旅顺监狱是沙俄和日本帝国主义统治旅（顺）大（连）时期-中国人民的一座法西斯魔窟。这座监狱是沙俄侵略者于1898年建立的。日本占领旅大后，日本关东都督府于1907年决定在沙俄所建监狱的基础上进行扩建，监狱也由原来的85间牢房增至253间牢房，可同时关押2000多人。日侵略者在此施用各种刑罚，残酷镇压和屠杀中国人民，留下大量罪恶实物证据。
旅顺监狱中关押的“犯人”，一般有数百人，1942年太平洋战争爆发后，关押最多达2000人。关押多是中国人，也有朝鲜和日本人。
监狱总占地22.6万平方米，其四周砌筑有4米高、725米长的红砖围墙，围墙内面积2.6万平方米，有各种牢房275间，可同时关押2000多人。除牢房外，围墙内还有检身室、刑讯室、绞刑室，以及使用犯人进行生产的机械、印刷、被服、制鞋等15座工厂，这些工厂强迫犯人为其生产军用品和日用品。监狱围墙外还有强迫被关押者劳动的窑场、林场、果园、菜地等。在围墙的外边还占据有大片的土地，建筑了住宅、砖窑等。
监狱的正面是办公楼，监狱办公楼亦是入口，位于监狱西南角。从正门走进去，便可看到向左、中、右三个方面伸延的三叉形牢房楼，牢房楼分两层，在三叉形的集中点上设置有一座看守台，站在这座高台上，不仅可以监视三个方向的各个牢房，同时还可以监视楼下的各个牢房。因为楼层中间的地板是用铁棍镶嵌的，铁棍之间留有空隙，所以看守也可以同时监视多个楼层。在监狱楼底下还单独修建了四间暗牢，这种暗牢里没有一点光线，是专门用来关押敢于反抗的关押者。
监狱东部为各个工厂。而监狱的东南角上设有一间绞刑室，是一座单独的二层小楼房，二楼上设有绞刑架，上面挂着三条绞索。绞索的下面设有一块自动翻板，当把绞索套到“犯人”的脖子上时，看守扳动手闸，暗板立即翻下去，“犯人”十几分钟便吊死了。“犯人”被绞死后顺着暗板洞下放到一楼，将尸体塞进事先准备好的木桶里，钉上桶盖，让其他“犯人”抬到监狱东侧的马莹后面埋掉。后期因死刑犯数量大幅增加，木桶严重缺乏，便将木桶改为活底，抬到墓地后尸体从木桶中掉出，木桶则重复利用；先后共有三个指定墓地。
监狱的医务系建于1916年，设有诊断室和18间病牢，病牢用于关押遭受严重毒打者和患病难以坚持服役者；设有18间病牢，分为普通病牢和隔离病牢两部分，定员40人。这里经常死人，尸体或者埋掉，或者抬日本医院，日本医科专门学校做解剖实验。
旅顺监狱于1902年始建，当时建有办公楼和85间青砖牢房(灰色建筑部分)。
1904至1905年临时作为日俄战争的野战医院和骑兵营。
1907年11月，日本改为关东都督府监狱本属，由驻满特命全权大使管理并进行扩建，牢房扩充至253间，并增加病房、验身室、暗牢、工场等附属设施。
1920年更名为关东厅监狱，并再次扩大监狱面积，新开窑场、菜地、林场，建看守训练所等。
1934年12月，更名“关东刑务所”。
1939年，定名“旅顺刑务所”。
1945年8月15日日本投降，旅顺监狱解体。
1971年7月，监狱旧址经过修复后，作为陈列馆向社会开放。
1988年，中华人民共和国国务院公布为全国重点文物保护单位(第三批)。
2017年12月2日，入选第二批中国20世纪建筑遗产名单。
