早年经历王丽坤出生于内蒙古自治区赤峰市翁牛特旗，她从小就在草原上长大，由于是放养状态，她小时候经常下河、爬树。王丽坤大学就读于北京舞蹈学院；2002年底，还在读大三的王丽坤因在练功房里一个不经意的回眸而被徐克选中，成为电视剧《七剑下天山》的女主角。
2004年，王丽坤凭借出色表现被徐克导演选中出演电视剧《七剑下天山》而出道。
2005年，王丽坤出演了电视剧《河流如血》，其表演能力在这部戏中得到了很大的锻炼和提升，同时也得到了《河流如血》的编剧海岩肯定。
2006年，王丽坤出演电视剧《爱就爱了》中的护校女生张天玉。
2007年，王丽坤出演电视剧《家》饰知识女性琴。同年，出演了电视剧《五号特工组》。
2008年，王丽坤出演电视剧《无间有爱》，在剧中扮演的是一个苦命却又乐观坚强的女孩儿——“小雪”；同年，在电视剧《当铺》中，王丽坤饰演的瑞芸香与吴流芳、尤光耀三个人是师兄妹，从小青梅竹马。
2009年，王丽坤在电视剧《加油优雅》（原名《傻女最牛》）饰康优雅。同年，出演了由柳云龙执导的电视剧《血色迷雾》，凭借悬念迭起、扑朔迷离的剧情，引来观众好评如潮，王丽坤饰演的郑晓聪也因此给大家留下了深刻的印象。同年，王丽坤在古装大戏《美人心计》中一人出色分饰三个性格迥异的角色而获得业界和观众的一致好评。在电视剧《理发师》中饰演富家千金宋嘉仪。
2010年，王丽坤和柳云龙再次牵手电视剧《告密者》。同时，她在谍战剧《迷案1937》（原名《上海迷案-1937》）中分饰一对性格迥异的双胞胎姐妹李梦露与李梦珠。
2011年，王丽坤出演电视剧《五号特工组2》。同年，在现代剧《婚巢》中饰阳雪，按导演林黎胜要求素颜出镜。在抗战剧《连环套》 中，王丽坤饰演八路军女播音员马小茴，为了完成中共的一套惊险计划，与孟庆凡假扮夫妻，潜伏于日本人的警戒之下。
2012年，王丽坤在电视剧《北京青年》中饰演了精神病患者任知了让她人气剧增。
2013年，出演电视剧《零下三十八度》，在剧中，与于和伟饰演年定邦、常青夫妻。
2014年，其与韩庚、姚星彤合作主演的都市情感喜剧电影《前任攻略》上映，在片中则饰演罗茜。3月7日，由王丽坤、罗晋、杨烁等主演的近代革命题材电视剧《狭路》举行了开机仪式。4月19日，某品牌大型公益环保植树活动在北京怀柔喇叭沟门国家森林公园举行，王丽坤头扎马尾辫清爽登场。4月27日，由某品牌基金会发起的“幸福林”大型公益环保植树活动登陆黑龙江哈尔滨。作为系列活动的最后一站，“爱心天使”王丽坤继北京站后，再次传递爱心，与黑土地上的百对情侣志愿者共同植树，播种绿色和希望。
6月25日，由王丽坤领衔主演的都市爱情剧《爱的多米诺》即日在北京、天津、广东、云南四大卫视同步播出。
2015年，在中央电视台元宵晚会上，表演舞蹈《国色天香》；4月16日，主演的电视剧《想明白了再结婚》在浙江卫视、深圳卫视联合播出；5月15日，与郑元畅、金范主演的电影《重生爱人》上映；6月12日，与刘恺威合作主演的电视剧《两生花》在浙江卫视、江苏卫视播出。
2016年，主演根据网络小说《美人谋：妖后无双》改编的古装玄幻剧《天泪传奇之凤凰无双》，在剧中饰演女主角缪芊芊。3月17日，《凤凰无双》已于近日在横店举行了开机仪式。此次王丽坤出演“聂无双”这个亦正亦邪的美人。9月14日，受邀出席“2017春夏纽约时装周”。随后，与高以翔合作主演浪漫爱情喜剧电影《情遇曼哈顿》，在片中饰演女主角白淇。之后，与杨洋、张天爱等合作主演古装玄幻武侠剧《武动乾坤》，在剧中饰演的九天太清宫宫主绫清竹。
2017年，其主演的古装魔幻喜剧电影《西游伏妖篇》上映，在片中则饰演蜘蛛精戚秦氏。
2018年，参演电视剧《海洋之城》。3月30日，参加综艺《信中国》。4月6日，参加综艺节目《王牌对王牌3》。4月28日，主演的电影《幕后玩家》上映。7月21日，主演的战争剧《游击战神》在广东TVS-1《第一剧场》播出。8月7日，主演的东方英雄传奇剧《武动乾坤》在东方卫视播出。8月17日，获得第一届中国双塔山爱情电影周年度盛典2017年度爱情电影优秀女主角奖。9月1日，参加综艺节目《快乐大本营》。10月11日，参演的电视剧《武动乾坤之冰心在玉壶》播出，在剧中饰演绫清竹。11月9日，参加的综艺节目《上新了·故宫》在北京卫视播出。12月4日，获第十五届MAHB年度先生盛典年度时尚女艺人奖。同月，《第一财经周刊》与秒针系统联合发布的“2018最具商业价值明星榜”，王丽坤排名第82位。
2019年，参演电视剧《三生有幸遇上你》。4月8日，参演的电视剧《封神演义》在湖南卫视播出，在剧中饰演苏妲己。5月31日，参加大型生活服务纪实节目《向往的生活》第三季。6月1日，参加综艺节目《快乐大本营》。9月20日，主演的电影《决胜时刻》在中国上映，在剧中饰演孟予。
2020年，参与合唱单曲《天使的身影》。4月10日，参演的综艺《王牌对王牌第五季》第八期定档在浙江卫视播出。4月15日，参加的融媒体直播节目《青春诗会·春天里的中国》定档在全网播出。4月23日，参加的综艺节目《希望搜索词》第八期定档在CCTV-3（综艺频道）播出。5月8日，参加的访谈节目《定义》定档在芒果TV播出。6月12日，参加的综艺节目《乘风破浪的姐姐》定档在芒果TV播出。7月3日，参加的生活方式体验类微纪录片节目《远方小隐》定档在爱奇艺播出。7月28日，参演的电影《检察风云》开机。9月2日，参加的综艺节目《海报里的英雄》第四期定档在CCTV-3播出。9月26日，主演的电视剧《经山海》开机，在剧中饰演吴小蒿。
2021年2月12日，主演的电影《侍神令》定档在中国内地上映。7月1日，参演的电视剧《光荣与梦想》播出。
经山海2021 饰演吴小蒿 导演杨亚洲 主演张国强
三生有幸遇上你 2020 饰演伍十一 导演刘雪松 主演黄景瑜、王策
封神演义2019-04-08 饰演苏妲己 导演杨晓明、吕行 主演罗晋、张博、于和伟、邓伦
海洋之城 2019 饰演天悦 导演陈昆晖 主演张翰、张雅玫、郭子千
武动乾坤2018-08-07 饰演绫青竹 导演张黎 主演杨洋、张天爱、释小龙、吴尊
天泪传奇之凤凰无双2017-10-04 饰演缪芊芊/聂无双 导演郑伟文、何振华 主演郑元畅、丁子峻、白冰
漂洋过海来看你2017-04-02 饰演苏芒 导演陈铭章 主演朱亚文、叶青、黄柏钧
狭路2015-12-19 饰演苗青(客串) 导演花箐 主演罗晋、杨烁、林源
爱情珠宝2015-09-11 饰演徐水晶(客串) 导演宋洋 主演pong、娄艺潇、毛林林
两生花2015-06-12 饰演颜宋 导演林添一 主演刘恺威、高仁、刘一含
想明白了再结婚2015-04-16 饰演于小鱼 导演尹涛 主演佟大为、邓家佳、刘莉莉
战神2014-09-18 饰演林燕 导演陈浩威、国建勇 主演陈思诚、杜淳、严宽
爱的多米诺2014-06-28 饰演谢小诺 导演刘雪松 主演宋春丽、于和伟、杨明娜
恋爱的那点事儿2013-12-23 饰演回眸女孩(客串) 导演谭朗昌、祝东宁 主演杜淳、佟丽娅、周一围
零下三十八度2013-12-15 饰演常青 导演姜凯阳 主演于和伟、李建义、徐程
枪花2013-04-16 饰演樊露 导演刘国豪 主演刘丛丹、程皓枫、黄俊鹏
婚巢2012-11-10 饰演阳雪 导演林黎胜 主演李乃文、黄明、袁中方
连环套2012-10-22 饰演马小茴 导演孙文学 主演于和伟、张志坚、郑晓宁
北京青年2012-08-16 饰演任知了 导演赵宝刚 主演李晨、马苏、任重
五号特工组之偷天换月2012-05-21 饰演高寒 导演赵青 主演于震、刘琳、淳于珊珊
青盲2012-03-01 饰演王玲雨 导演杨文军 主演于和伟、沙溢、苏岩
唐宫美人天下2011-11-24 饰演百合(客串) 导演李慧珠 主演张庭、李小璐、明道
爱上微笑2011-09-16 饰演陈良缘 导演郭臻钰 主演陈键锋、杨千霈、姜育恒
告密者2011-09-12 饰演戴秀雅 导演刘进 主演柳云龙、张嘉译、刘孜
盛女的黄金时代2011-05-03 饰演梁爽 导演蓝志伟 主演陈键锋、王传一、郑希怡
美人心计2011-04-04 饰演聂慎儿 导演吴锦源 主演林心如、陈键锋、杨幂
迷案19372010-12-18 饰演李梦露 导演柳国庆 主演保剑锋、姚刚、郑晓宁
理发师2010-11-13 饰演宋嘉仪 导演潘文杰 主演李晨、涂松岩、王绘春
无间有爱2010-04-18 饰演小雪 导演刘一志 主演贺军翔、邓家佳、靳东
当铺2009-10-12 饰演瑞芸香 导演李小平 主演丁海峰、姜峰、倪大红
侍神令2021-2-12导演李蔚然 主演陈坤、周迅
检察风云2020导演麦兆辉
决胜时刻2019-9-12 饰演播音员孟予 导演黄建新、宁海强 主演黄景瑜、张涵予、濮存昕、马晓伟、曹炳琨、秦岚、马天宇等
幕后玩家2018-04-28 饰演魏思蒙 导演任鹏远 主演徐峥、段博文、朱珠、王砚辉
情遇曼哈顿2017-08-25 饰演白淇 导演李巨源 主演李媛、高以翔、王传君
西游伏妖篇2017-01-28 饰演戚秦氏 导演徐克 主演吴亦凡、林更新、姚晨
重生爱人2015-05-15 饰演苏莹 导演曹大伟 主演郑元畅、金范
有一个地方只有我们知道2015-02-14 饰演金天 导演徐静蕾 主演吴亦凡、徐静蕾、热依扎
事出有姻2015导演杜军 主演玛莉亚·嘉西亚·古欣娜塔、黄海波、李赞
前任攻略2014-01-31 饰演罗茜 导演田羽生 主演韩庚、郑恺、姚星彤
因情圆缺22013-03-28 饰演童萱 导演李蔚然 主演李晨、曹炳琨
八十一格2008-09-10 饰演胡燕婷 导演张瑜 主演阿穆隆、王睿、张瑜
《终于》 2015-05-05 电视剧《想明白了再结婚》片尾曲
《原谅我》 2012-03-14 个人单曲
《讽刺》 2012-08-21 个人单曲
2011年11月18日，参加由中华少年儿童慈善救助基金会发起的“希望之履”主题公益活动。
2014年4月，参加“幸福林”植树公益活动，并与百对情侣志愿者共同植树，播种绿色和希望。
2015年8月13日，参加由韩红爱心慈善基金会发起的“韩红爱心、百人援贵”医疗援助系列公益行动；同年8月27日，担任“天晴儿童美术绘本基金会”形象大使。
2015-07 第17届华鼎奖观众最喜爱的影视明星奖 （提名）
2015-03-22 “亚洲电影颁奖礼”亚洲飞跃女演员奖 （获奖）
2013 “风尚志七周年颁奖盛典”最具人气演员奖 （获奖）
2013 “第八届BQ红人榜颁奖盛典”最受欢迎女演员奖 （获奖）
2013 “MSN时尚影响力大典”最具人气女演员奖 （获奖）
2012 “安徽卫视亚洲偶像盛典”最受媒体关注艺人大奖 （获奖）
2012 “MSN慈善夜”年度飞跃女明星奖 （获奖）
2011 “2011中国时尚大典”年度星光女演员奖 （获奖）
2009 “2009年度娱乐星锐榜”影视十大星锐奖 （获奖）
2015-05 “第3届伦敦国际华语电影节”最具实力女演员奖 （获奖）
2015-05 “第22届北京大学生电影节”最受欢迎女演员奖 （获奖）
2012-12-31 “国剧盛典”年度最具突破精神大奖 （获奖）
2013-04-01 “北京电视剧之夜”观众喜爱的最具潜质女演员奖 （获奖）
2011-05-05 “春季电视剧盛典”最佳女新人奖 （获奖）
2017-12-19 新浪时尚风格大赏年度品质艺人奖 （获奖）
2018 2017年度爱情电影的优秀女主角 （获奖）
王丽坤身上有种武侠精神，一点脂粉气都没有（徐克评）。
王丽坤由于多年习舞的经历，让其有着不错的柔韧度；而她高束起马尾搭配运动装，则使整个人看起来十分利落、阳光。王丽坤在电视剧《美人心计》中的表现不仅十分到位，而且还可圈可点。她将聂慎儿的两种极端性格演绎得尽善尽美，并对聂慎儿热情、泼辣、温柔、阴毒、孤独等情感的表达把握得非常到位。王丽坤在电视剧《金耳环》中，将年龄跨度很大的戏演绎得游刃有余，而她也凭借其张弛有度的表演，给观众留下了深刻的印象（腾讯评）。
王丽坤具有清新的形象与精湛的演技。她在电视剧《战神》中的表演令人眼前一亮，其身上独有的纯净、美好、温暖的气质也成为吸引目光的焦点，其细腻、深入的演技对于角色的诠释入木三分，柔中带刚，也成为了整部戏的调和剂（北青网评）。
王丽坤在一组水墨画风格的写真中，她的举手投足、一颦一笑都尽显其清丽脱俗的气质，将女性的妩媚和小性感表现得淋漓尽致（新华网评）。
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