1935年，迷上了田河水泡的漫画《野狗》，和派拉蒙影业公司发行的动画短片《大力水手》，因此开始“依样画葫芦”，照着原作画画。
1945年，开始在《少国民新闻》上连载四格漫画《小马日记》，从此走上漫画之路。
1947年，根据酒井七马原作改编的漫画《新宝岛》发行，该作开创了影响日本漫画意识形态。并且人们由此开始接受"新漫画"的概念。此后陆续创作出《森林大帝》《铁臂阿童木》《怪医黑杰克》《小飞龙》《三眼神童》等大量脍炙人口的长篇作品，屡次获得各种奖项。
1950年，加入了东京儿童漫画会，并且认识了学童社的加藤谦一。至此便开始在《漫画少年》连载《森林大帝》。而当时的他已是漫画单行本界的霸王了。
1952年，其科幻巨作《原子小金刚》也开始了连载。同时作品《洛克冒险记》、《我的孙悟空》。
1954年，创作了长篇巨作《火之鸟》黎明篇、《少年侦探》。
1958年，创作的《小美子》《漫画生物学》荣获第三届小学馆漫画奖。手冢本人还参与了东映动画公司《西游记》的卡通制作。同时作品《森太郎》《小平平》《电影万岁》。
1961年，成立"手冢治虫Production动画部"，日本第1部多集TV动画《铁臂阿童木》、第1部彩色多集TV动画《森林大帝》等一大批优秀的动画作品均诞生于此，晚年时制作的各种实验性动画在国际社会上得到很高的评价。
1962年，制作的第一部卡通动画作品《某个街角的故事》上映。同时作品《野玫瑰的精灵》《勇者大丹》《铁血丝路》。
1963年，制作的日本第一部电视黑白卡通《原子小金刚》于富士电视台放映。其《某个街角的故事》荣获艺术祭奖励赏、每日电影奖大藤信郎赏和蓝缎带教育文化电影奖。
1965年，《原子小金刚》荣获厚生大臣的表彰。同时作品《火箭大使》《四神奇》。
1966年，以日本首部彩色电视卡通《森林大帝》荣获电视记者协会奖特别奖。
1967年，开始连载的被称为其创作生涯巅峰的探讨生命奥秘的作品《火之鸟》。
1986年，以《昭告阿道夫》荣获讲谈社漫画奖《一般部门赏》。同时作品《火之鸟》太阳篇、《暗夜》。
1987年，着作散文集《观赏. 制作. 放映 》荣获电影旬报杂志的最佳读者奖。同时作品《鲁德威西B 》《未来人》
1989年2月9日，因胃癌逝世，享年60岁。
《小马日记》《新宝岛》《森林大帝》《原子小金刚》《洛克冒险记》、《我的孙悟空》《火之鸟》《森太郎》《小平平》《电影万岁》《野玫瑰的精灵》《勇者大丹》《铁血丝路》《原子小金刚》《暗夜》等。
他的创作主题多样，除了他最为关注的生命主题以外，成长主题和人与自然关系都是他反复思考和探讨的问题。手冢治虫的作品内涵丰富、耐人寻味，充满了东方的智慧以及对未来的思索。无论是诗歌、小说、漫画还是影视作品，都是作者思想沉淀的一个反映。手冢治虫在每一部作品中以不同的方式，提出他长久思考的一个问题，他曾经说过：“只要是生命，不管是人类或其他生物，都是完全平等的，因为人类不过是在这生命共同体中生存的一份子。”所以，他的作品题材虽不同，但是将民族思想对民族发展造成影响等令人反思的社会学议题融入其中，显示了浓郁的人文色彩。
在手冢治虫的领导下，日本动漫逐渐走向国际，日本也从一个制作简单动画的国度变成一个具有世界影响力的动漫大国，他不仅是日本动漫发展的领军人物，也让世人从他的身上看到了日本动画积极向上的精神。日式动漫被更多的动漫学者和制作人所引用。手冢治虫在动画领域贡献是开创有限动画的先河，实现日本动画发展的开端，首创将故事情节连续性带入动画中。
除了《铁臂阿童木》这样的全年龄作品之外，手冢治虫还探索性地创作了他的“成人动画三部曲”《一千零一夜》《埃及艳后》和《悲伤的贝拉多娜》。这三部动画长片都改编自历史故事或神话寓言，手冢利用自己独特的想象力，大大拓展了动画的题材和表现手法，为动画艺术呈现出宽广的可能性。
手冢治虫不仅在主流动画领域问鼎巅峰，在非主流动画领域也是建树惊人。从“虫制作公司”刚刚创建，直到20世纪80年代末，手冢先后创作了《一滴水》《残片》《人鱼》《跳》《雄性》等实验性彩色动画短片，这些充满创新意识的作品，象征着手冢治虫不断闪现的灵感火花，它们在题材、叙事结构、视觉风格以及技法等诸多方面呈现了日本动画的另一面。
1947年的《新宝岛》，首次运用了以电影技巧来绘制漫画的手法。采用变焦、广角、俯视等电影技术绘图，以分镜头的方式连接，摆脱了以传统漫画单角度视图和微变化的绘画方式，成为漫画的叙事标准。
1953年的《蓝宝石王子》，这是被公认的第一部少女漫画，并奠定了日本少女漫画意识形态基础。
1963年的《铁臂阿童木》，是首部日本国产电视动画，在富士电视台获得30%的高收视率，创下日本历来动画收视率纪录，这部电视动画作品其实已经是比较完善的日本动画的雏形。
手冢治虫的贡献不仅仅是创作了那么多脍炙人口的连环画，他还培养和带出了一整代画书创作人才。近半个世纪以来。日本连环画的繁荣昌盛与他的作用是分不开的（新华网评）。
日本的漫画家不可谓不多，各种漫画作品充斥着市场，但是漫画家中可称之为大师的却少之又少，无疑，但手冢治虫例外，手冢本身不是艺术家出身，漫画技巧也不是尽善尽美，可是他的作品中有“生命”存在，影响了早期一大部分的画家，他被誉为“日本动漫之父”，他是日本现代动漫的奠基人，也是日本动漫界的精神领袖。从带来的经济效应看，不管个别动画创作者对手冢治虫的评价是什么，都不能否定他对日本动漫界的影响，几乎所有的动画创作者都曾受到手冢治虫的作品启蒙。手冢治虫在那个年代创作的作品都是一种创新的尝试，都是经历过时间的沉淀，他取得的是极大的成功，他对待生命的敬重，对心灵的深度思考，可以说他不仅仅是一位漫画家，同时更是一位哲学家。
